专利名称：一种抗菌肽缓释微胶囊的制备方法
技术领域：
本发明涉及ー种微胶囊的制备方法。
背景技术：
微胶囊技术又称为微胶囊包埋技木，或微胶囊造粒技木，是将固体、液体和气体物质包埋在同一个微型胶囊内，成为ー种固体微粒的技木。通常把构成微胶囊外壳材料称为“壁材”或“包衣”，把包在微胶囊内部物质称为“囊心”或者“芯材”等。芯材可以是固体、液体或气体。通常，把微胶囊化方法大致分为三类，化学法、物理法和物理化学法。其中化学法包括界面聚合法、原位聚合法、锐孔-凝固法、包络法等；物理法包括锅包法、空气悬浮法、喷雾法、挤压法等；物理化学法包括复合凝聚法、单凝聚法、油相分离法、复相乳液法、粉末床法等。 目前最为常用的是以壳聚糖、海藻酸钠为包埋材料制备的微胶囊。将壳聚糖溶解于こ酸溶液，加入一定量的氯化钙，并用NaOH溶液调节壳聚糖溶液的pH值；另称取海藻酸钠加入蒸馏水中，并使其充分溶解，然后加入芯材，用玻璃棒搅匀。最后将芯材与海藻酸钠的水溶液缓慢滴入到壳聚糖-氯化钙溶液中，磁力搅拌器低速搅拌，收集微胶囊，干燥备用。这种方法需要将芯材与海藻酸钠的水溶液缓慢逐滴滴入壳聚糖-氯化钙溶液中才能保证微胶囊中芯材的包膜率和包裹均匀；但是这种制备方式只适合于实验室或小規模生产，难以形成产业化大規模生产。抗菌肽具有广谱杀菌作用，包括对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，尤其对耐药菌株有明显的抑杀作用。例如，从麻蝇分离到的sarcotoxin I在浓度为O. 3 μ g/mL时就足以杀死志贺氏菌、巨大芽孢杆菌、微球菌、棒状杆菌、Proteus sonnei以及对链霉素产生耐药性的大肠杆菌。Moriein (丝蚕抗菌肽)对大肠杆菌JM109、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等13种细菌均有明显的抑制作用，而且它们的最小致死浓度均低于0.9 μ M。麻蝇抗菌肽SarCotoxinIA能抑制某些有害肠道菌的生长，尤其是对常引起食物中毒的大肠杆菌0157作用效果最明显，而且它对正常人体内的共生细菌并无损伤，因此可用来改变肠道细菌群落的组成，从而增强人体体质。抗菌肽对细菌杀伤作用主要是通过改变膜的通透性，使菌体因细胞内溶物外泻而死亡，或者抗菌肽穿过膜与DNA、RNA结合，快速导致细菌死亡，这种杀菌方式不易使细菌产生耐药性的突变菌株，有望开发为新一代抗菌药物。但是现有的抗菌肽也缺乏ー种有效地缓释包膜。

发明内容
本发明要解决现有壳聚糖/海藻酸钠微胶囊制备方式只适合于实验室或小規模生产，难以形成产业化大規模生产和现有抗菌肽也缺乏有效地缓释包膜的问题。抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备一、将海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，形成缓释颗粒；
ニ、将抗菌肽和缓释颗粒一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。本发明制备方法在配制壳聚糖酸溶液过程中未添加氯化钙，不会造成毒性残留，并避免了氯化钙在制备过程中对被包埋抗菌肽的影响，使其活性不丧失。壳聚糖分子链上有大量的伯氨基，海藻酸钠的分子链上有大量的羧基，可以正负电荷吸引形成聚电解质膜。本发明制备方法修改了缓释微胶囊的配方和エ艺，并采用高速匀质机和医用混合机进行包埋，适合大規模产业化生产，而且抗菌肽包埋均匀。进行β-环糊精包埋不但可以将抗菌肽包封率提高到90%以上，而且本发明制备的缓释微胶囊能更有效地进行抗菌肽的稳定缓释。本发明制备方法制备的抗菌肽缓释微胶囊外观形态圆整、均匀，抗菌肽缓释微胶囊干燥后的粒径I. 2 3mm。抗菌肽微粒粒径约为O. 35 O. 65mm ;干燥后的抗菌肽微粒粒径为O. I O. 2mm。
本发明制备方法制备的抗菌肽缓释微胶囊不产生抗药性，抗菌肽包封率高达90%以上，可大規模产业化生产。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备一、将海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，形成缓释颗粒；ニ、将抗菌肽和缓释颗粒一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。
具体实施方式
ニ 本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤一中壳聚糖酸溶液中壳聚糖质量浓度为O. 25% (W/V) I. 5% (W/V)、脱こ酰度为82% 85%，壳聚糖由分子量为3. 3 X IO5 4. 6 X IO5的高分子量壳聚糖和分子量为O. 72 X IO5 I. 19 X IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 3 O. 8。其它步骤及參数与实施方式一相同。本实施方式中壳聚糖酸溶液浓度需> O. 25% (W/V)，壳聚糖酸溶液浓度升高，微胶囊的控制性增强。本实施方式中葡萄糖作为可塑剂加入，可提高缓释微胶囊强度5%以上。低分子量壳聚糖所制备的微胶囊颗粒強度高，其制备的微胶囊颗粒厚度高于高分子量壳聚糖，抗膨胀能力较强，因而机械強度较强；但壳聚糖分子量过低，其韧性和弾性相对较差；而壳聚糖进入海藻酸钠的深度一祥，分子量越大的壳聚糖和海藻酸钠的结合位点数就越多，在海藻酸钠间架桥的能力就越强，形成微胶囊的強度就越高，控释就相对越強。本发明中合理的配比低分子量壳聚糖与高分子量壳聚糖之间的比例，使微胶囊颗粒的強度与韧性和弾性都有明显的提高。本发明抗菌肽缓释微胶囊的强度达74. 95以上，韧性及弹性达58. 42以上；抗菌肽和缓释颗粒进行包埋的包封率70. 26。而且抗菌肽在含有高分子量壳聚糖和低分子量壳聚糖的混合壳聚糖制备的微胶囊颗粒中的释放慢，能够有效的缓释，达到长期稳定持续的释放药物。实验表明抗菌肽在本发明混合壳聚糖制备的微胶囊颗粒中的释放速度比单纯高分子量壳聚糖制备的微胶囊颗粒更慢，本发明抗菌肽缓释微胶囊12小时抗菌肽释放量为70%，而添加单纯高分子壳聚糖12小时抗菌肽释放量为85%。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一或ニ的不同点是步骤一海藻酸钠水溶液中海藻酸钠的质量浓度为I. 5% 2.0%。其它步骤及參数与实施方式一或二相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一、ニ或三的不同点是步骤一海藻酸钠水溶液与壳聚糖酸溶液混匀过程中调节PH值为5. 2 5. 7。其它步骤及參数与实施方式一、ニ或三相同。本实施方式制备方法步骤一海藻酸钠水溶液与壳聚糖酸溶液混匀过程中调节pH值为5. 5本实施方式制备出的抗菌肽缓释微胶囊強度最高。而且实验证明制备过程中反应体系的PH值越高缓释微胶囊释放蛋白的速度随之加快，且释放速度随蛋白质分子量的降低而增加。在体外模拟(胃液、肠液)试验以及动物学试验表明这个微胶囊在小鼠小肠表面能够粘附48小时以上无破裂，从而保证药物能够被小肠充分吸收。微囊化药物体外溶出实验条件下，12小时内在模拟肠液中释放85%，而在模拟胃液中仅仅释放15%，从而保证包 封药物不被胃酸破坏，这种微胶囊在制剂エ艺条件下干燥后，能够保持其原有的強度性能和控释性能，可以用于固体制剂。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
一至四之一的不同点是步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6。其它步骤及參数与实施方式一至四之一相同。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
一至五之一的不同点是步骤一形成的缓释颗粒的粒径为O. 35 O. 65mm，烘干后的粒径为O. I O. 2mm。其它步骤及參数与
实施方式一至五之一相同。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
一至六之一的不同点是步骤ニ中抗菌肽与缓释颗粒的质量比为(3. 3 8. 6) (2 4)，抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成,低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD ;闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD。其它步骤及參数与实施方式一至六之一相同。本实施方式中抗菌肽选用低分子量和高分子量两种抗菌肽，因为分子量不同其释放速度不同，抗菌药效也因此延续，达到持续平稳有效地释放。高分子量抗菌肽的获得将低温冷藏的蝇蛆，用组织粉碎机粉碎，过滤蛆皮等杂质，然后用盐析法提取高分子量抗菌肽。低分子量抗菌肽的获得用菠萝蛋白酶或木瓜蛋白酶(4000U/g)分解高分子量抗菌肽，高分子量抗菌肽浓度为60 100g/L、菠萝蛋白酶或木瓜蛋白酶的用量为I. 5% (质量分数)、PH值为7、酶解温度为45°C、酶解时间为80 200分钟。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
一至七之一的不同点是步骤ニ中环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入环糊精和淀粉，然后用挤压制粒机或旋转制粒机进行β -环糊精包埋；β -环糊精与淀粉的质量比为(O. 05
O.I) (99. 95 99. 9)，β -环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的6. 9 17. 2倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为I. 2 3_。其它步骤及參数与实施方式一至七之一相同。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
一至八之一的不同点是步骤ニ中抗菌肽微粒的粒径为O. 35 O. 65mm。其它步骤及參数与实施方式一至八之一相同。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
一至九之一的不同点是步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为O. I % 5%的有机酸或无机酸；溶剂优选为こ酸。其它步骤及參数与实施方式一至九之一相同。
具体实施方式
i^一 本实施方式与具体实施方式
一至十之一的不同点是步骤ー中高速匀质机的转速为8000 20000r/min。其它步骤及參数与实施方式一至十之一相同。
具体实施方式
十二 本实施方式抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备一、将质量浓度为I. 5% 2. O %的海藻酸钠水溶液和质量浓度为O. 25% (W/V)
I.5% (W/V)、脱こ酰度为82% 85%的壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，并调节pH值为
5.5，形成缓释颗粒； ニ、抗菌肽与缓释颗粒按质量比为(3. 3 8. 6) (2 4)的比例一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。步骤一种壳聚糖由分子量为3. 3 X IO5 4. 6 X IO5的闻分子量壳聚糖和分子量为O. 72 X IO5 I. 19 X IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 3 O. 8 ;步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为O. 1% 5%的有机酸或无机酸；步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6 ；步骤ニ中抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成，低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD,闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD ；步骤ニ中β -环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入β -环糊精和淀粉，然后用挤压制粒机或旋转制粒机进行β -环糊精包埋；β -环糊精与淀粉的质量比为(O. 05 O. I) (99. 95 99. 9)，β -环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的6. 9 17. 2倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为I. 2 3mm。步骤一中高速匀质机的转速为8000 20000r/min。本实施方式方法步骤ニ中抗菌肽微粒的粒径为O. 35 O. 65mm。本实施方式方法制备的抗菌肽缓释微胶囊抗菌肽包封率高达90%以上，可大規模产业化生产。本实施方式方法制备的抗菌肽缓释微胶囊不产生抗药性，针对不同的防治对象可选用不同的抗菌肽。对于志贺氏菌、巨大芽孢杆菌、微球菌、棒状杆菌、Proteus sonnei、对链霉素产生耐药性的大肠杆菌、大肠杆菌JM 109、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、有害肠道菌(尤其是对常引起食物中毒的大肠杆菌0157)、杀死铼刀菌Fusarium moniliforme、杀死铼刀菌Fusarium oxysporium、人类和植物病原真菌都有优异的抑制和杀灭效果。而且采用抗菌肽对正常人体内的共生细菌并无损伤，因此可用来改变肠道细菌群落的组成，从而增强人体体质。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶囊动物实验本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶囊动物实验表明，抗菌肽缓释微胶囊在小鼠小肠表面能够粘附48小时以上无破裂，从而保证药物能够被小肠充分吸收。抗菌肽缓释微胶囊药物体外溶出实验条件下，12小时内在模拟肠液中释放85 %，而在模拟胃液中仅仅释放15%,从而保证包封药物不被胃酸破坏。抗菌肽缓释微胶囊在制剂エ艺条件下干燥后，能够保持其原有的強度性能和控释性能，可以用于固体制剂。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶囊释放介质pH值实验本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶囊释放介质pH值实验表明，抗菌肽缓释微胶囊在酸性或碱性介质中释药性能均良好，但具有PH依赖性，在酸性介质中释药速率较之在碱性介质中快。在酸性介质中，碱溶性的ALG (海藻酸钠)为不溶性骨架，酸溶性的Cts (壳聚糖)为可溶性凝胶；在碱性介质中则反之。药物通过溶解扩散及囊材溶蚀而释放。随着高分子在体内的降解，本实施方式抗菌肽缓释微胶囊的复合膜结构逐渐变得疏松，使内含抗菌肽从中溶解和扩散的阻力減少，抗菌肽释放速率加快。当抗菌肽释放速率的加快恰好与含药量減少所引起的释药速率变慢一致时，抗菌肽的长期恒量释放得以实现，因而本实施方式抗菌肽缓释微胶囊在酸性和碱性条件下均显示出良好的释药性能。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶的强度是75. 02，韧性及弹性是58. 42。
具体实施方式
十三本实施方式抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备一、将质量浓度为I. 6%的海藻酸钠水溶液和质量浓度为I. 0% (W/V)、脱こ酰度为82%的壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，并调节pH值为5. 5，形成缓释颗粒；ニ、抗菌肽与缓释颗粒按质量比为3. 3. 4的比例一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。步骤一种壳聚糖由分子量为3. 5 X IO5 4. 5 X IO5的闻分子量壳聚糖和分子量为O. 75 X IO5 I. 15 X IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 4 ；步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为O. 2%的こ酸；步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6 ；步骤ニ中抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成，低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD,闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD ；步骤ニ中β -环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入β -环糊精和淀粉，然后用挤压制粒机进行β-环糊精包埋；β-环糊精与淀粉的质量比为O. 05 99.95，β -环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的17倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为2. 5mm 3mm。步骤一中高速勻质机的转速为10000r/min。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶的强度是75. 23，韧性及弹性是59. 17。本实施方式方法制备的抗菌肽缓释微胶囊抗菌肽包封率为96. 5%，可大規模产业
化生产。本实施方式抗菌肽从麻蝇中分离获得，因此本实施方式获得的抗菌肽缓释微胶囊可以有效地杀死志贺氏菌、巨大芽孢杆菌、微球菌、棒状杆菌、Proteus sonnei以及对链霉素产生耐药性的大肠杆菌。
具体实施方式
十四本实施方式抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备一、将质量浓度为I. 6%的海藻酸钠水溶液和质量浓度为0. 8% (W/V)、脱こ酰度为85%的壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，并调节pH值为5. 5，形成缓释颗粒；ニ、抗菌肽与缓释颗粒按质量比为4 3. 5的比例一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。步骤一种壳聚糖由分子量为3. 8 X IO5 4. 2 X IO5的闻分子量壳聚糖和分子量为
O.80 X IO5 I. IOX IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 5 ；
步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为I %的盐酸；步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6 ；步骤ニ中抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成，低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD,闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD ；步骤ニ中β -环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入β -环糊精和淀粉，然后用旋转制粒机进行β-环糊精包埋；β-环糊精与淀粉的质量比为O. 07 99.93，β -环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的15倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为2. 2mm 2. 5mm。步骤一中高速勻质机的转速为12000r/min。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶的强度是75. 88，韧性及弹性是59. 02。本实施方式方法制备的抗菌肽缓释微胶囊抗菌肽包封率为97. 3%，可大規模产业
化生产。本实施方式抗菌肽为丝蚕抗菌肽，因此本实施方式获得的抗菌肽缓释微胶囊对大肠杆菌JM 109、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等13种细菌均有明显的抑制作用。
具体实施方式
十五本实施方式抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备—、将质量浓度为2. O %的海藻酸钠水溶液和质量浓度为I. 2% (W/V)、脱こ酰度为84%的壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，并调节pH值为5. 5，形成缓释颗粒；ニ、抗菌肽与缓释颗粒按质量比为6 3的比例一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。步骤一种壳聚糖由分子量为3. 7 X IO5 4. IX IO5的闻分子量壳聚糖和分子量为
O.90 X IO5 I. 18 X IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 6 ；步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为3%的こ酸；步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6 ；步骤ニ中抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成，低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD,闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD ；步骤ニ中β -环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入β -环糊精和淀粉，然后用挤压制粒机进行β-环糊精包埋；β-环糊精与淀粉的质量比为O. 09 99.91，β -环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的12倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为I. 8mm 2mm。步骤一中高速勻质机的转速为15000r/min。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶的强度是74. 53，韧性及弹性是62. 52。本实施方式方法制备的抗菌肽缓释微胶囊抗菌肽包封率为97. 3%，可大規模产业
化生产。
具体实施方式
十六本实施方式抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备
一、将质量浓度为I. 8%的海藻酸钠水溶液和质量浓度为I. 3% (W/V)、脱こ酰度为84%的壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，并调节pH值为5. 5，形成缓释颗粒；ニ、抗菌肽与缓释颗粒按质量比为8 2的比例一同加入医用混合机中进行包埋，并调节PH值为5. 5，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。步骤一种壳聚糖由分子量为3. 5 X IO5 4. OX IO5的闻分子量壳聚糖和分子量为
I.OOX IO5 I. IOX IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 7 ；步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为4%的こ酸；步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6 ；
步骤ニ中抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成，低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD,闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD ；步骤ニ中β -环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入β -环糊精和淀粉，然后用旋转制粒机进行β-环糊精包埋；β-环糊精与淀粉的质量比为0.1 99.9，β-环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的8倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为I. 4mm I. 8mm。步骤一中高速勻质机的转速为18000r/min。本实施方式制备的抗菌肽缓释微胶的强度是76. 58，韧性及弹性是59. 02。本实施方式方法制备的抗菌肽缓释微胶囊抗菌肽包封率为97. 3%，可大規模产业
化生产。
权利要求
1.抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于抗菌肽缓释微胶囊按以下步骤制备 一、将海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，形成缓释颗粒； ニ、将抗菌肽和缓释颗粒一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β -环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。
2.根据权利要求I所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤一中壳聚糖酸溶液中壳聚糖质量浓度为0.25% (W/V) I. 5% (W/V)、脱こ酰度为82% 85%，壳聚糖由分子量为3. 3 X IO5 4. 6 X IO5的高分子量壳聚糖和分子量为O. 72 X IO5 I. 19 X IO5的低分子量壳聚糖按I : I的质量比组成；而且壳聚糖酸溶液中加入葡萄糖，壳聚糖酸溶液中壳聚糖与葡萄糖的摩尔比为O. 3 O. 8。
3.根据权利要求2所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤一海藻酸钠水溶液中海藻酸钠的质量浓度为I. 5% 2. O %。
4.根据权利要求3所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤一海藻酸钠水溶液与壳聚糖酸溶液混匀过程中调节pH值为5. 2 5. 7。
5.根据权利要求4所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤一海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液中海藻酸钠与壳聚糖质量比为4 6。
6.根据权利要求5所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤一形成的缓释颗粒的粒径为O. 35 O. 65mm，烘干后的粒径为O. I O. 2mm。
7.根据权利要求6所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤ニ中抗菌肽与缓释颗粒的质量比为(3. 3 8. 6) (2 4)，抗菌肽由低分子量抗菌肽和高分子量抗菌肽按I : 2的质量比组成,低分子量抗菌肽的相对分子量为6. 2 17. 2KD ;闻分子量抗菌肽的相对分子量为40 50KD。
8.根据权利要求7所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤ニ中β-环糊精包埋按以下步骤进行向抗菌肽微粒中加入β_环糊精和淀粉，然后用挤压制粒机或旋转制粒机进行β -环糊精包埋；β -环糊精与淀粉的质量比为(O. 05 O. I) (99. 95 99. 9)，β -环糊精和淀粉的重质量是抗菌肽微粒质量的6. 9 17. 2倍；β -环糊精包埋后得到的抗菌肽缓释微胶囊的粒径为I. 2 3mm。
9.根据权利要求7所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤ニ中抗菌肽微粒的粒径为O. 35 O. 65mm。
10.根据权利要求9所述的抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，其特征在于步骤一中壳聚糖酸溶液的溶剂为体积浓度为O. 1% 5%的有机酸或无机酸。
全文摘要
一种抗菌肽缓释微胶囊的制备方法，它涉及一种微胶囊的制备方法。本发明解决了现有壳聚糖/海藻酸钠微胶囊制备方式只适合于实验室或小规模生产，难以形成产业化大规模生产和现有抗菌肽也缺乏有效地缓释包膜的问题。制备方法一、将海藻酸钠水溶液和壳聚糖酸溶液用高速匀质机混匀，形成缓释颗粒；二、将抗菌肽和缓释颗粒一同加入医用混合机中进行包埋，得到抗菌肽微粒，然后对抗菌肽微粒进行β-环糊精包埋，即得到抗菌肽缓释微胶囊。本发明可用于抗菌肽药物的生产，在医药领域具有极大的发展空间。
文档编号A61K9/50GK102824332SQ201210341909
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月14日 优先权日2012年9月14日
发明者曲琪环 申请人:东北农业大学